Estudio Microbiológico de Pacientes con Infección Urinaria


Las infecciones de las vías urinarias, cualquiera que sea su localización, se manifiestan con la eliminación de gérmenes por la orina, la que normalmente es estéril. El diagnóstico etiológico de estas infecciones se hace mediante el Urocultivo.

En ocasiones la orina puede contener pequeña cantidad de gérmenes sin estar produciendo infección, debido generalmente a la contaminación con microorganismos que habitan normalmente en la uretra o que se encuentran en cavidades vecinas (vagina). Para descartar esta posibilidad se emplea el Urocultivo cuantitativo, que establece como bacteriurea significativa, cifras mayores de cien mil gérmenes por ml.

AGENTES PATÓGENOS
1. Escherichia coli
2. Proteus mirabillis
3. Klebsiella sp.
4. Enterobacter sp.
5. Estafilococo aureus, Estafilococo epidermidis
6. Enterococo
7. Pseudomona aeruginosa.
8. Serratia marcescens
9. Candida albicans

TOMA DE MUESTRA
1. La muestra debe ser en lo posible la primera orina de la mañana. De no ser así debe tratar de retenerse la orina el mayor tiempo posible en la vejiga antes de la recolección para incrementar el número de microorganismos por mililitro.
2. Debe utilizarse frasco estéril
3. Dar instrucciones al paciente sobre el aseo previo con agua y jabón en la zona genital.
4. El método de recolección es el de “chorro medio” que consiste en que el paciente no recolecte la orina del inicio si no que sea la de unos segundos después de iniciada la micción.
5. En caso el paciente tenga sonda Foley no recolectar la orina de la bolsa colectora sino directamente de la sonda con una jeringa estéril.
6. En caso de niños es mejor usar bolsa colectora especial.
7. En casos muy especiales puede realizarse una punción suprapúbica

MATERIALES:
Muestras de orina.
Placas de Agar Me. Conkey y Azida
Láminas y laminillas cubreobjetos
Asa de siembra.

PROCESAMIENTO:
1. SIEMBRA
  • Antes de proceder en la siembra, homogenizar la muestra agitándola suavemente.
  • Preparar una placa con Agar Me. Conkey y otra con Agar Azida.
  • Proceder a la siembra: calentar al rojo vivo el asa de siembra que debe estar calibrada en 0.001 mi, esperar que enfrié, introducirla verticalmente solo hasta que cubra la porción del asa y retirarla rápidamente. Hacer una estría vertical del borde al centro de la placa petri y luego hacer estrías por agotamiento perpendicularmente a la estría vertical.
  • Incubar a 37°C toda la noche.
  • Centrifugar 10 ml de orina y leer el sedimento urinario, anotar: Leucocitos, Gérmenes y otros (tricomonas, hongos, etc.)

2. LECTURA
  • Si no hay crecimiento en ningún medio informar como NEGATIVO
  • Si hay crecimiento proceder al recuento de colonias: cada colonia representa a 1,000 UFC/ml (Unidad Formadora de Colonias por mililitro). Si el recuento es < 100,000 UFC/ml informar como NEGATIVO.

3. DIFERENCIACIÓN
  • Si creció > 100,000 UFC/ml en Me. Conkey repicar en TSI, LIA, Citrato y Urea. Incubar a 37°C toda la noche.
  • Si creció > 100,000 UFC/ml en Agar Azida, observar tipo de colonia, gram. si es estafilococo hacer prueba de Coagulasa.
  • Si crecen colonias de levaduras hacer prueba de Tubo germinal para ver si es Candida albicans.

4. ANTIBIOGRAMA
Una vez identificado el germen se puede proceder a realizar el antibiograma:
Colocar los siguientes discos:
1) Nitrofuranos: Nitrofurantoina
2) Quinolonas: Ac. Nalidixíco, Norfloxacina, Enocacina
Cinoxacina, Ac. Pipemédico, Ciprofloxacina.
3) Aminopenicilinas: Ampicilina
4) Sulfas: Trimetropin - Sulfametoxazol
5) Cefalosporinas: Ceflacor, Ceafalexina.

En caso de Pseudomona agregar:
6) Carbenicilina
7) Ceftazidime

PREGUNTAS DE EVALUACIÓN:
  1. ¿Cómo interpreta el crecimiento de 50,000 UFC en un paciente inmunocomprometido?
  2. ¿Por frecuencia señale los gérmenes que producen ITU?